Оценка протективных свойств вакцины «АВИВАК – ИБК» из штамма Н-120

Н.В. Бахарева, С.Л. Козаков, А.Г. Кузовлёва, С.Н. Норкина, Е.В. Терентьева НПП «АВИВАК»

Инфекционный бронхит (ИБК) – острое контагиозное заболевание цыплят и кур различного возраста. Основным способом борьбы с болезнью является профилактическая вакцинация молодняка и несушек, в связи с чем эффективность проводимых мероприятий во многом зависит от качества вакцины.

Прошло более 50 лет с момента, когда от цыплят из провинции Брабант (Нидерланды) был выделен вирус инфекционного бронхита кур, который, пройдя 120 последовательных пассажей через эмбрионы кур, стал известен как вакцинный штамм Н-120 (Bijlenga et al., 2004). Вместе с тем, известно, что штаммы вируса ИБК, при пассажировании на развивающихся куриных эмбрионах, постепенно снижают не только свою вирулентность и, как следствие, реактогенность, но и иммуногенность (Kliev A.V., Cumming B.B. 1988). Примером такого длительного пассирования может служить апатогенный неиммунизирующий штамм Beaudette, который не вызывает изменений в мерцательном эпителии трахеи и развивается преимущественно в субэпителиальных клетках (Geilhausen H.E. et al. 1973). В связи с этим нам представлялось интересным узнать иммуногенную активность вируса штамма Н-120, используемого нами для производства вакцины.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Материалы
1. Производственный вирус инфекционного бронхита кур штамма «Н-120» с активностью 5,79 lg ЭИД/мл;
2. Вирулентный вирус инфекционного бронхита кур штамма «Чапаевский» с активностью 5,2 lg ЭИД50/мл;
3. SPF-цыплята.

Методы
Двухнедельные цыплята были разделены на 4 группы по 10 голов, размещены в отдельные изоляторы и обработаны следующим образом:
– Птиц 1 и 2 группы не вакцинировали;

Цыплята из 3 и 4 группы были иммунизированы соответственно перорально (per os) и интратрахеально (i/tr) вакцинным вирусом ИБК штамма «Н-120» в дозе 3,5 lg ЭИД50/гол.
Через 3 недели после вакцинации птиц из 2, 3 и 4 группы интратрахеально зара жали вирулентным вирусом ИБК штамм «Чапаевский» (0,1мл) в дозе 2,7±0,1 lg ЭИД50.

Рекомендуем прочитать:  Шотландский скоттиш страйт: характер, внешность, основы ухода

На 38 и 41 день опыта во всех группах убивали по 5 цыплят и незамедлительно исследовали эксплантаты, приготовленные по Darbyshire J.H. (1980). Для этого каждую трахею удаляли с минимальным травматизмом и поперечно разрезали на кольца, толщиной около 1,5 мм. Из верхней части трахеи вырезали 3 эксплантата, из средней части – 4 и из нижней – 3, получая таким образом по 10 эксплантатов от каждой птицы. Индивидуальные эксплантанты для предотвращения высыхания помещали их в тёплую питательную среду МЕМ с температурой 37° С и исследовали в световом микроскопе при малом увеличении (×200). Цилиарная активность (подвижность ресничек) характеризовалась своеобразным «мерцанием» эпителия (рис. 1), выстилающего внутреннюю поверхность трахеи.

Птиц, давших 50% и более эксплантатов с цилиарной активностью, считали имунно защищенными от действия вирулентного вируса ИБК.

Рис. 1. Мерцательный эпителий в трахеальном эксплантате.

Мерцательный эпителий в трахеальном эксплантате

РЕЗУЛЬТАТЫ ИСЛЕДОВАНИЯ
Как видно из таблицы у цыплят контрольной группы цилиарная активность сохранялась во всех эксплантатах, что служит подтверждением чистоты проводимого эксперимента.

У невакцинированных птиц из группы 2 зараженных вирулентным вирусом ИБК штамм «Чапаевский», подвижность трахеальных ресничек отсутствовала, однако на 6 день после заражения в отдельных эксплантатах наблюдали начальную стадию репарации мерцательного эпителия.

У большинства цыплят из группы 3, привитых перорально, на 3-й день после заражения выявлено наличие подвижности ресничек в 8-10 эксплантатах, что свидетельствует об их защищённости от действия вирулентного вируса. И только у одного из 5 привитых цыплят наблюдали отсутствие «мерцания» эпителия в 6 трахеальных кольцах. На шестой день после инфицирования вирусом ИБК штамм «Чапаевский» цилиарную активность отмечали у всех птиц.

У цыплят, вакцинированных интратрахеально группа 4, уже на 3-й день после заражения обнаружена цилиарная активность в 100 % случаев.

Рекомендуем прочитать:  Особенности распространения оральных болезней собак в саратове

Таблица 1
Цилиарная активность эксплантатов цыплят


груп-
пы

Группа подопытных птиц

Через 3 дня после заражения

Через 6 дней после заражения

№ цыплёнка

№ цыплёнка

1

2

3

4

5

1

2

3

4

5

1

Контроль

10*

10

10

10

10

10

10

10

10

10

2

Вирус ИБК штамм Чапаевский

1

2

1

3

Н-120 per os +Чапаевский

10

8

10

4

9

10

10

10

10

10

4

H-120 in/tr +Чапаевский

7

10

10

10

10

10

10

10

10

10

* – количество эксплантатов, обладающих цилиарной активностью.

ВЫВОДЫ
Полученные результаты показывают, что применяемый для изготовления вакцин против ИБК производственный вирус инфекционного бронхита кур штамм «Н-120» продолжает являться достаточно иммуногенным по отношению к вирулентным вирусам инфекционного бронхита кур, относящихся к серотипу Массачусетс.

Л и т е р а т у р а
1. Кюне П. Исследования перекрестной защиты после применения живых ослабленных ibv-вакцин nobilis ® ib 4–91 и nobilis® ib ma5 (тип «массачусетс»). Сборник материалов III Международного ветеринарного конгресса по птицеводству 2007г. стр.89–94.
2. Bijlenga G., J. K. A. Cook, J. Gelb, Jr. and J. J. de Wit. 2004. Development and use of the H strain of avian infectious bronchitis virus from the Netherlands as a vaccine: a review. Avian Pathology 33: 550–557.
3. Darbyshire J.H. Assessment of cross-immunity chickens to strains of avian infectious bronchitis virus using tracheal organ cultures. Avian Pathology, 9: 179–184, 1980.
4. Geilhausen H.E., F.B. Ligon, P.D. Lukert. 1973. The pathogenesis of virulent and avirulent avian infectious bronchitis virus. Arch.Gesamte Virusforsch. 40:285–290.
5. Kliev A.V., R.B. Cumming. 1988. Immunity and cross-protection to nephritis produced by Australian infectious bronchitis viruses used as vaccines. Avian Pathology 17:829–839.

Подготовлено по материалам «Vого Международного Ветеринарного Конгресса по Птицеводству» для webmvc.com

Рекомендуем прочитать:  Симптомы появления глистов у кошки

Добавить комментарий